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白術(shù)內(nèi)脂含量測定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-06-05 | 37 次瀏覽 | 分享到:
白術(shù)內(nèi)酯是從中草藥白術(shù)中提取出來的一種倍半萜類化合物,包含白術(shù)內(nèi)酯I,II,III三種結(jié)構(gòu),核心結(jié)構(gòu)含有內(nèi)酯環(huán)和倍半萜骨架。白術(shù)內(nèi)酯能通過抑制NF-kB等炎癥信號通路,減少炎癥因子如TNF-α,IL-6的釋放。同時(shí),還有免疫調(diào)節(jié),胃腸道保護(hù)等作用。白術(shù)在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品,具有溫、甘、苦,補(bǔ)脾益氣,燥濕利水等能力。

白術(shù)內(nèi)酯是從中草藥白術(shù)中提取出來的一種倍半萜類化合物,包含白術(shù)內(nèi)酯I,II,III三種結(jié)構(gòu),核心結(jié)構(gòu)含有內(nèi)酯環(huán)和倍半萜骨架。白術(shù)內(nèi)酯能通過抑制NF-kB等炎癥信號通路,減少炎癥因子如TNF-α,IL-6的釋放。同時(shí),還有免疫調(diào)節(jié),胃腸道保護(hù)等作用。白術(shù)在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品,具有溫、甘、苦,補(bǔ)脾益氣,燥濕利水等能力。


實(shí)驗(yàn)室檢測白術(shù)內(nèi)酯含量,一般會采用高效液相色譜(HPLC)法。如果要測3個(gè)結(jié)構(gòu)的,就要這3個(gè)結(jié)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)品,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)回歸方程,計(jì)算含量。當(dāng)然,也有采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS),通過離子峰的形式定量計(jì)算。以HPLC為例,簡單的介紹一下檢測流程。如果要自己做,或可以咨詢或檢索相關(guān)的文獻(xiàn)資料,獲得更為準(zhǔn)確的參數(shù)和操作步驟。



1.樣品處理


將植物樣品進(jìn)行粉碎處理,并過100目篩,稱取1g的粉末,倒入容量瓶中,加入15ml的甲醇,超聲處理,冷卻出來后用甲醇稀釋到刻度,0.45um膜過濾,待測。


2.色譜條件


選擇適合的色譜柱,比如C18的柱子(250mm×4.6mm,5μm),柱溫25-30℃,以甲醇和純水為流動相,等度洗脫,流速為1ml/min;紫外檢測器,波長220nm。僅供參考,以實(shí)際測定為準(zhǔn)。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


精確的稱量白術(shù)內(nèi)酯I,II,II的標(biāo)準(zhǔn)品若干克,用甲醇溶解,并成倍的稀釋5-7個(gè)濃度點(diǎn)。其中,最低點(diǎn)為定量限,一般為信噪比S/N的10倍。依次進(jìn)樣到HPLC中,測定出對應(yīng)的色譜峰。記錄色譜峰的保留時(shí)間,并對色譜峰面積進(jìn)行積分處理。擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)R2要大于0.999,越接近1線性越好。


4.含量計(jì)算


將樣品注入HPLC中,和標(biāo)準(zhǔn)品相同的色譜條件,識別出目標(biāo)色譜峰,對峰面積進(jìn)行積分,代入到回歸方程,就可計(jì)算出樣品溶液中的3個(gè)白術(shù)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的含量。將它們在一起,因?yàn)闃悠啡芤菏墙?jīng)過稀釋的,需要考慮到稀釋倍數(shù),結(jié)合計(jì)算才能得到樣品中的白術(shù)內(nèi)酯含量。


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