黃芪皂苷是從中藥材黃芪中提取出來(lái)的一種活性成分，具有多種藥理作用，比如增強(qiáng)免疫力，抗疲勞，抗氧化，抗炎等。黃芪皂苷的主要是由糖苷和皂苷兩部分組成，其中糖苷包括葡萄糖，鼠李糖等，皂苷部分包括甾體或三萜類(lèi)化合物。目前從黃芪中分離出來(lái)的皂苷有很多種，主要有黃芪皂苷I，II，III，IV等。黃芪皂苷在植物中的含量比較低，在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過(guò)程中一般會(huì)采用高效液相色譜（HPLC）或液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）等方法測(cè)定含量。

1.樣品處理

通過(guò)70%的甲醇進(jìn)行回流提取，水飽和正丁醇萃取黃芪中的皂苷成分。

2.色譜條件

采用C18的色譜柱，250mmx4.6mm，5um，柱溫25-30℃；以乙腈和水，或0.3%甲酸和乙腈，梯度洗脫，流速為1.0ml/min，進(jìn)樣量10-20uL。下面就是檢測(cè)器了，我看有不同種類(lèi)的檢測(cè)器。有的用示差檢測(cè)器(RID)，也有蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD），還有質(zhì)譜檢測(cè)器（MS）。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

計(jì)算含量，用外標(biāo)法的話就是標(biāo)準(zhǔn)曲線。采用黃芪皂苷的一種類(lèi)型的標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解和稀釋?zhuān)ǔＪ遣捎昧鲃?dòng)相中的有機(jī)溶劑。這樣的話，標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)入到流動(dòng)相中就不會(huì)發(fā)生突然的變化，從而導(dǎo)致色譜峰出現(xiàn)不規(guī)則。對(duì)每個(gè)參數(shù)的調(diào)整，都需要開(kāi)發(fā)或驗(yàn)證，從而確定最佳的色譜條件，獲得相對(duì)準(zhǔn)確的有效的色譜峰。梯度稀釋?zhuān)纬?-7個(gè)濃度點(diǎn)，進(jìn)樣到HPLC中，測(cè)定出對(duì)應(yīng)的色譜峰。當(dāng)然，如果是質(zhì)譜，就是被打碎的具有質(zhì)荷比（m/z）的離子峰。對(duì)峰面積進(jìn)行積分，在表格中對(duì)應(yīng)到它的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，可以繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，相關(guān)系數(shù)需要大于0.999。

4.含量計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)品已經(jīng)走過(guò)一遍了，現(xiàn)在可以上機(jī)測(cè)樣品溶液。樣品出來(lái)的峰可能會(huì)比較多，并沒(méi)有標(biāo)品那么純凈。但是，根據(jù)色譜柱的特點(diǎn)，在標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖中找到它的保留時(shí)間，就能對(duì)應(yīng)的分析出來(lái)樣品色譜圖中的位置，識(shí)別出目標(biāo)峰。對(duì)峰面積進(jìn)行手動(dòng)或自動(dòng)積分，代入到回歸方程，計(jì)算出對(duì)應(yīng)黃芪皂苷的含量。