槐果堿是一種生物堿類化合物，來源于豆科植物苦參的干燥根?；惫麎A的化學(xué)式為C15H23BrN2O，分子量327.27，可溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮和苯，微溶于水，易溶于稀酸。在科研的領(lǐng)域，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫、抑制中樞神經(jīng)等作用。

常用的檢測方法：高效液相色譜（HPLC）、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）等。以HPLC為例，簡單的介紹一下檢測流程。

1.樣品處理

稱取0.2g樣品，放到具塞的錐形瓶中，加入20ml的乙腈-0.1%磷酸（13:87）（三乙胺調(diào)節(jié)pH值到8.0，下同）溶液，稱重一下并記錄。接著，進(jìn)行超聲波處理，功率300W的話，可設(shè)置45Hz的頻率，超30min，放冷。用乙腈-0.1%磷酸溶液補(bǔ)足減少的重量，過濾，待測。

2.色譜條件

C18的色譜柱，250mm長，4.6mm內(nèi)徑，5um的粒徑，30℃的柱溫。流動(dòng)相以甲醇和0.2%磷酸水，或乙腈和0.1%磷酸為流動(dòng)相，梯度洗脫。紫外檢測器，波長205-220nm。流速1ml/min，進(jìn)樣量10uL。僅供參考。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

精確的稱取槐果堿的標(biāo)準(zhǔn)品，加入流動(dòng)相，制成20ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)母液，再對它進(jìn)行梯度的、成倍的稀釋6個(gè)濃度點(diǎn)。最低點(diǎn)在檢測器的有效范圍內(nèi)，也就是定量限。盡可能的覆蓋到樣品溶液的有效范圍內(nèi)。依次進(jìn)樣到HPLC中，測出各個(gè)濃度點(diǎn)的色譜峰。對各個(gè)色譜峰的保留時(shí)間進(jìn)行記錄，并對它的峰面積進(jìn)行積分處理。將峰面積和對應(yīng)它的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，在表格中可擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，確保線性的有效性，重復(fù)性在可接受范圍內(nèi)。

4.樣品含量

測定樣品的含量，就是在和標(biāo)品相同的色譜條件下，測出樣品的色譜峰。通過標(biāo)品的保留時(shí)間，可識別出目標(biāo)化合物的色譜峰。對這個(gè)色譜峰的面積進(jìn)行積分，然后代入到回歸方程，就可以得到樣品溶液的槐果堿含量。這個(gè)不是樣品中的槐果堿含量，需要進(jìn)一步的考慮稀釋倍數(shù)，從而獲得更準(zhǔn)確的含量計(jì)算。